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Apr 10, 2023

一価ワクチンを使用した一次、二次、三次デング熱をモデル化する第 1 相試験

Infezione da BMC

BMC 感染症第 23 巻、記事番号: 345 (2023) この記事を引用

583 アクセス

6 オルトメトリック

メトリクスの詳細

同時循環し、免疫学的に相互作用する 4 つのデング熱ウイルス血清型 (DENV1 ～ 4) は、準防御免疫が重篤なデング熱疾患のリスクを高める可能性があるため、ワクチン設計に独特の課題をもたらします。 既存のデング熱ワクチンは、DENV 血清陰性の人では有効性が低いですが、DENV に曝露された人では有効性が高くなります。 異なる血清型への連続曝露後のウイルス複製および疾患に対する防御に強く関連する免疫学的対策を特定することが緊急に必要とされている。

これは第 1 相試験であり、DENV3 血清型がゼロ（血清陰性）、非 DENV3 血清型が 1 つ（異型）、または 2 つ以上（多型）の DENV 血清型に対する中和抗体を持つ健康な成人に、弱毒化 DENV3 一価生ワクチン rDEN3Δ30/31-7164 がワクチン接種されます。 。 私たちは、非風土病集団におけるワクチン接種前の宿主免疫がDENV3ワクチン接種の安全性と免疫原性にどのような影響を与えるかを調査します。 ワクチンは安全で忍容性が高く、すべてのグループで 0 日目から 28 日目までに DENV1-4 中和抗体の幾何平均力価が大幅に増加すると仮定します。血清陰性グループと比較して、多型グループの平均ピークは低くなります。ワクチンウイルス血症は、以前のDENV曝露によって与えられた防御により起こりますが、異型グループは軽度の増強により平均ピークウイルス血症がより高くなります。 二次的および探索的エンドポイントには、血清学的、先天的、および適応的細胞反応の特徴付けが含まれます。 DENV感染細胞のプロウイルスまたは抗ウイルスへの寄与を評価する。 トランスクリプトーム、表面タンパク質、BおよびT細胞受容体の配列と、連続画像誘導細針吸引によって採取された末梢血および所属リンパ節の両方の単一細胞の親和性を免疫学的にプロファイリングします。

この試験では、非流行地域に住む自然感染したヒトの一次、二次、三次のDENV曝露後の免疫反応を比較します。 この研究は、新しい集団でデング熱ワクチンを評価し、血清型を超えた免疫の誘導をモデル化することで、ワクチンの評価に情報を提供し、潜在的な対象集団を広げる可能性があります。

NCT05691530 2023年1月20日に登録。

デング熱は、世界中で最も蔓延しているベクター媒介ウイルス性疾患であり、年間 5,000 万から 1 億人の感染者を引き起こしています [1]。 2017 年には、200 万人以上の障害調整生存年がデング熱に起因すると考えられており、デング熱は世界的な負担が増加している数少ない感染症の 1 つです [2、3]。 罹患率が高いにもかかわらず、デング熱に対する普遍的に有効なワクチンは入手困難である[4]。 デング熱は、4 つのデングウイルス血清型 (DENV1 ～ 4) のいずれかによって引き起こされます。 通常、最初の DENV 感染は重篤ではなく、その血清型による再感染に対する長期にわたる防御効果をもたらすと考えられています。 対照的に、異なる血清型による DENV の二次感染では、一次感染と比較して、デング出血熱/デングショック症候群のリスクが 24 倍高くなります [5]。 DENV 感染間の間隔が長いことも、重症化と相関します [6]。 重度のデング熱は、抗体依存性の増強と関連している可能性があり、一次感染によって誘導される低レベルの交差反応性抗体が、Fcγ受容体を持つ細胞内での二次感染ウイルスの内在化と複製を促進し、その結果、より早期かつより高いピークウイルス血症と免疫調節不全を引き起こします。応答[7]。 より高い平均ピークウイルス血症および重度のデング熱も、CD8+ T 細胞応答の遅延と関連しています [8]。

抗体依存性の増強の誘導を避けるために、3 つの主要なワクチン候補である Dengvaxia、TAK-003、TV003 は生弱毒化された 4 価であり、各血清型に対する特異的免疫を同時に誘導することを目的としています。 TV003 の第 1/2 相試験では、被験者の約 3 分の 2 で 4 価の中和抗体反応が誘導されることが示されています [9、10、11]。 第 3 相有効性試験が進行中ですが、最初の 2 年間の追跡データでは、以前の血清状態に関係なく DENV1 に対して 90% の有効性、DENV 血清陽性者の DENV2 に対して 84% の有効性、DENV 血清反応陰性者の DENV2 に対して 58% の有効性が示されています。 12]。 これらの血清型に対する有効性を報告するには DENV3 および DENV4 の症例が不十分であり、これらのデータはまだ収集中です。 驚くべきことに、Dengvaxia と TAK-003 は in vitro で 4 つの DENV 血清型すべてを中和する抗体を誘導しますが、ワクチンの有効性は株によって異なり、血清変換だけでは防御を予測できませんでした [13]。 Dengvaxia は DENV4 に対して強力な防御を誘導し、TAK-003 は DENV2 に対して強力な防御を誘導しますが、どちらのワクチンも他の血清型に対しては完全な防御を提供せず、どちらも時間の経過とともに有効性が大幅に低下します [14、15、16、17、18]。 最も懸念されるのは、20カ国で認可され、フィリピンとブラジルの集団予防接種プログラムに導入されたDengvaxiaは、DENV血清陰性の人におけるデング熱入院リスクを大幅に増加させることである。

2 回目の異型感染は重篤なデング熱のリスクが最も高くなりますが、3 回目と 4 回目の感染は通常それほど重症ではありません [19]。 二次的な DENV 曝露は、一次曝露によって誘導された低親和性の交差反応性 B 細胞の成熟を通じて広範な中和抗体を誘導すると仮説が立てられています [20、21、22]。 連続感染は、血清型特異的エピトープから保存領域への標的化から T 細胞応答の進化にも関連しています [23]。 注目すべきことに、Dengvaxia と TAK-003 は両方とも、DENV 血清反応陰性の人よりも DENV 血清陽性の人において高い有効性を示しており、これは、DENV 感染歴がある場合でも、ワクチン接種によってもたらされる免疫原性と防御を安全に改善できることを示唆しています。 異種逐次免疫化は、血清型間で保存されている防御エピトープに細胞応答および体液性応答を集中させることにより、強力な広範囲中和抗体および T 細胞を誘導する可能性があります。 マウスを用いたデング熱 DNA ワクチンに関する 1 つの前臨床研究では、4 価ワクチン接種を繰り返す場合と比較して、異なる血清型を使用した連続 1 価ワクチン接種では、曝露された血清型と曝露されていない血清型の両方に対して、より強力な細胞性および体液性反応が誘導されたことが報告されました [24]。 一価デング熱生弱毒生ワクチンを用いた唯一のヒト逐次免疫試験では、異型ワクチンの二次ワクチン接種と一次DENV2ワクチン接種後に観察された唯一の副作用は、より早期の発症とより高い平均ピークウイルス血症、およびより高い発疹頻度であった[25]。 最初のワクチン接種では、強力な型特異的で弱い交差反応性抗体が生成されましたが、二次ワクチン接種では、曝露血清型と非曝露血清型の両方に対して効果的な中和抗体が誘導されました。 この研究は、連続的な DENV 曝露の安全なヒトモデルから得られる免疫学的洞察の概念実証を提供します。

以前の研究に基づいて、我々は、異なる DENV 免疫プロファイルが、制御された DENV 曝露に対するウイルス、自然、細胞、体液性の反応にどのような影響を与えるかを評価することを目的としています。 さらに、モデル設計の重要な要素として、画像誘導による連続結節免疫特性評価のパラダイムを評価します。 他の変数を考慮することにより、我々の研究は、ウイルス複製と、連続曝露が広範な防御デング免疫を誘導するプロセスに関連する新規バイオマーカーを同定できる可能性がある。

一価の rDEN3Δ30/31-7164 は、NIAID/NIH によって開発された四価のデング熱ワクチン候補 TV003 の 4 つのウイルス成分のうちの 1 つです。 これは、弱毒化のために 3' 非翻訳領域 (UTR) に 30 個および 31 個の非連続ヌクレオチド欠失と、Vero 細胞適応変異 (アミノ基に対応するヌクレオチド位置 7164) をもつ野生型 DENV-3 Sleman/78 ウイルスに由来します。 NS4B Val→Ala の酸 115）[26、27]。 4 つの一価ワクチン株のうち、rDEN3Δ30/31-7164 は平均ピークウイルス血症力価と標準誤差が最も低いものの 1 つであり、本質的に一貫した複製を示唆しており、ブラジルでは DENV 血清陽性者と血清陰性者ではウイルス血症の頻度が低かった [11、28]。 したがって、rDEN3Δ30/31-7164接種は比較的低い平均ピークウイルス血症力価を維持し、グループ間のウイルス血症力価の差はワクチン株の変動ではなく宿主免疫に起因する可能性が高いと予想されます。

DENV3 は臨床的に関連性があり、免疫学的にユニークな血清型であり、この試験での rDEN3Δ30/31-7164 の使用は以前の研究を拡張するものです。 具体的には、既存の抗DENV抗体の低レベルはDENV3を増強し、高レベルは保護するため、我々の試験は両方の症状の理想的なモデルとなっている[29]。 これは、交差反応性免疫が DENV1 の二次疾患から保護する DENV1 や、広範囲の既存の抗体力価にわたって強化される DENV2 とは対照的です [30]。 臨床試験では、TAK-003ワクチンは血清反応陰性の被験者をDENV3症候性デング熱入院患者から保護することができなかった[19、31、32]。 この失敗は、TAK-003 の DENV3 コンポーネントの複製の失敗に関連している可能性がありますが、このコンポーネントの複製が検出されなかったにもかかわらず、ワクチンは血清陰性の被験者を DENV1 から保護しました [33]。 したがって、TAK-003 が DENV3 に対して防御できない根拠は完全には理解されていません。 この知識のギャップにもかかわらず、ヒトで実施された唯一の逐次一価ワクチン接種試験はDENV1、2、および4を利用したが、一価rDEN3Δ30/31-7164ワクチン接種はフラビウイルス血清陰性の個体でのみ評価された[25、30、34]。 ウォルター・リード陸軍研究所は、DENV3の異なる攻撃株を使用して2つの試験を実施し、合計7人の血清陰性の個人と4価のデング熱ワクチン候補で予防接種を受けた10人の個人を検査したが、どちらの試験にも自然感染歴のある個人は含まれていなかった[ 35、36]。 多型群と異型群の反応を比較することにより、我々の研究は、血清型特異的免疫対軽度の増強の関連マーカーおよび/またはドライバーを特定する可能性がある。 要約すると、生きた弱毒化全長 DENV3 に対する応答を精査することは、臨床的および免疫学的に関連する問題に対処するのに役立ちます。

親株と比較して、rDEN3Δ30/31-7164 は、重症複合型免疫不全症 (SCID) マウスのモデルであるアカゲザルの幼若期および蚊において複製が制限されています [26]。 rDEN3Δ30/31-7164 は 1 つの第 1 相臨床試験で評価され、TV003 は複数の第 1 相および第 2 相試験 [9、10、11、28、37、38] で評価されており、第 3 相試験の完全なデータは保留中です (NCT02406729) ）。 rDEN3Δ30/31-7164 の一価ワクチン接種は、フラビウイルスに曝露された個人ではテストされたことはありませんが、このウイルスは、優れた安全性プロファイルを備えたいくつかの四価製剤の一部として免疫のある個人に投与されています。 3 つの第 1 相試験すべてにおいて – 一価 rDEN3Δ30/31-7164 (n = 50)、フラビウイルス血清陰性参加者における TV003 (n = 60)、およびフラビウイルス血清陽性参加者における TV003 (以前の黄熱ウイルス ワクチンでは n = 29、n = 11人が一価DENVワクチン接種者、n = 8人が西ナイルウイルス、セントルイス脳炎、または日本脳炎ウイルス免疫のいずれかを保有） – 発疹のみがワクチン群とプラセボ群でより頻繁でした[9、10、28]。 フラビウイルス血清陽性の参加者を対象とした TV003 の研究では、ほとんどの人が DENV 免疫ではなく黄熱ウイルス免疫を有していた (60% 対 23%)、rDEN3Δ30/31-7164 は、フラビウイルスでより高いウイルス血症力価を示す唯一の血清型でした。血清陽性群と血清陰性群（平均力価：0.97 対 0.60 log10 PFU/mL、p = 0.04; 最大力価：2.4 対 1.2 log10 PFU/mL）。 ブラジルでは、ワクチンウイルス血症は、DENV血清陽性グループよりもDENV血清陰性グループでより頻繁に発生し、インドでは、参加者全員にウイルス血症は観察されず、全員がDENV血清陽性でした。 したがって、根底にあるフラビウイルス免疫の種類と最後の曝露からの時間は、ウイルス血症の頻度とピーク力価に影響を与える可能性があります。 しかし、DENVの血清状態に関係なく、rDEN3Δ30/31-7164ウイルス血症のピーク値（102.4PFU/mL）は、蚊の伝播に必要なウイルス血症（105感染単位/mL）や症候性ウイルス血症で観察されるウイルス血症（106感染単位/mL）よりも桁違いに低かった。 ）および重篤なデング熱（108感染単位/mL）[25、27]。 したがって、rDEN3Δ30/31-7164 は、免疫応答の増強および防御を調べるための安全で適切なモデルです。

これは、DENV免疫状態（血清陰性、非DENV3単型、または多型）が、弱毒生一価ワクチンrDEN3Δ30/31-7164による免疫化に対する安全性と防御をどのように調節するかを評価することを主目的とした、第1相部分盲検試験である（図1）。 1A）。 研究の主要評価項目は次のとおりです: (i) 各ワクチン接種後 28 日間の局所的および全身的な反応原性の兆候および症状、各ワクチン接種後 28 日までの予期せぬ有害事象 (AE)、および重篤な有害事象 (SAE) の頻度と重症度）180日目まで。 (ii) 0日目から28日目までのDENV1-4中和抗体幾何平均力価(GMT)の変化。 (iii) 3 日目から 15 日目までのウイルス定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応 (qRT-PCR) によって測定されたグループ間の平均ピークウイルス血症 (表 1)。 ワクチンは安全で忍容性が高く、0日目から28日目までのDENV1-4中和抗体GMTの統計的に有意な増加および/または2日間の測定可能なウイルス血症によって示されるように、グループはワクチン株による感染の証拠を得るだろうと仮説を立てています。多型群は血清陰性群よりも平均ピークウイルス血症が低く、これは以前の曝露による防御効果を示していますが、異型群はワクチン複製の軽度の増強により平均ピークウイルス血症が高くなります。 第 2 の目的は、グループ間の 57 日目の中和抗体 GMT および 15 日目の CD8+ T 細胞応答の変化を調べることにより、DENV 免疫状態がワクチンの免疫原性にどのような影響を与えるかをさらに評価することです。 探索的エンドポイントでは、単一細胞シークエンシングにより、感染過程における先天的および適応的細胞応答、活発にDENV感染した細胞の細胞活性、末梢血およびリンパ節における免疫細胞およびその受容体の表現型、転写、および分子プロファイルを評価します。 リンパ節サンプリングを繰り返すことで、B細胞の動員と成熟、Tfh細胞のシグナル伝達と提示、デング熱感染細胞の頻度の長期的評価を通じて、胚中心反応の細胞動態を探索することが可能になります。

トライアルデザイン。 各グループのベースライン免疫状態とDENV3ワクチン接種後の予想される結果(A)。 この試験にはオプションでワクチン接種前の同意、採血、リンパ節吸引が含まれますが、これらは-59日目から0日目までに行われる可能性があります(B)。 ワクチン接種とその後の採血、ウイルス血症の評価、リンパ節吸引について概説します。 BioRender.com で作成されました。

この研究はメリーランド州ベセスダにある国立衛生研究所臨床センターで実施される。 18歳から59歳までの約200人が資格基準を満たしているかどうかを判断するためにスクリーニングされ、45人が登録される予定です（表2）。 血清型特異的な DENV 免疫は、プラーク (免疫焦点) 減少中和試験 (PRNT) によって決定されます。 抗DENV抗体は時間の経過とともに減少する可能性があるため、DENV免疫の閾値は高く、DENV血清陰性の閾値は低くなります（図2）。 すべての個人は、過去の DENV およびフラビウイルスへの曝露に関する調査に回答します。 この情報は、DENV 血清陰性者のナイーブステータスを確認するために使用されます。 他のフラビウイルスへの曝露の可能性が不確実な場合、対象ウイルス（日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、黄熱ウイルスなど）に対する PRNT による確認検査が開始されます。 基準を満たす 15 人の参加者が、フラビウイルス血清陰性、非 DENV3 単型 (ワクチン血清型と異型)、および多型の 3 つの研究グループのそれぞれに登録されます。

グループ決定のためのスキーマ。 すべての人は、プラーク減少中和アッセイによってデング熱免疫について評価されます。 1:40 希釈で感染性プラークが 70% 以上減少した場合、免疫があるとみなされます。 DENV1、DENV2、または DENV4 (ワクチンに対して異型) に対する単型免疫を持つ人、および DENV3 (多型) を含む 2 つ以上の血清型に対する免疫を持つ人が対象となります。 免疫閾値を満たさない個人が DENV 血清陰性グループに含まれるには、すべての血清型に対して 1:10 希釈で感染性プラークが 50% 未満減少していなければなりません。 渡航歴やワクチン接種歴によって示唆される他のフラビウイルスへの曝露の可能性がある場合は、対象のウイルスに対する確認抗体検査が行われます。 すべての血清陰性の個人は、フラビウイルスに感染していない必要があります。

各参加者は研究0日目にrDEN3Δ30/31-7164の1回投与を受け、最初の1か月の6、9、15、および28日目に臨床評価およびAE評価を受けることになります（表3）。 これらの日は、グループ間で異なる可能性が最も高い AE である発疹を観察する機会を最大化するために選択されました。 これまでの試験では、TV003 投与後の発疹の発症は 7 ～ 15 日目に起こり、通常は 5 ～ 10 日間続くことが示されています。 6 日目以前、または 15 日目から 28 日目までの間では、安全性シグナルは観察されませんでした ([28] 補足資料の臨床プロトコル)。 ウイルス血症のための採血、PBMC の収集、臨床モニタリング検査、および/または抗体力価測定は、0、1、3、6、9、12、15、28、57、90、および 180 日目に行われ、オプションの採血も行われます。 365 日目 (図 1B)。 求められた注射部位およびワクチン接種に関連する全身反応の評価は、28 日目まで行われます。rDEN3Δ30/31-7164 ワクチン接種に関連する可能性がある、おそらく、または明らかに関連する予期せぬ AE および SAE は、最後に必要な臨床来院である 180 日目まで収集されます。 参加者は、オプションで 365 日の訪問に参加することを選択できます。これにより、反応の持続期間を調べることができます。

オプションの高解像度超音波ガイド下のリンパ節細針吸引（LN FNA）は、ワクチン接種前と 15、28、および 57 日目に行われ、最大の皮質を持ち、同側腕の腋窩血管に最も近い流入リンパ節を標的とする [39] ]。 理想的には、グループあたり少なくとも 5 人の参加者が少なくとも 15 日目と 28 日目に吸引を受けることになります。 ワクチン接種前のベースライン LN FNA はすべての参加者に提供されますが、57 日目の吸引は 15 日目および/または 28 日目の LN FNA を完了した参加者にのみ提供されます。 LN FNA を受ける参加者には、処置に関連した AE を評価するために 24 ～ 48 時間以内に連絡されます。

主要評価項目は安全性と免疫原性であり、グループは既存の免疫によって定義されるため、参加者はランダム化されません。 AE および免疫原性マーカーの偏った評価を避けるために、統計学者と 1 人の計算生物学者を除くすべての研究スタッフは、各参加者の最終的なグループ割り当てを知らされません。 フラビウイルス血清陰性およびデング血清陽性の可能性のある人にスクリーニング対象を絞り込むため、すべての参加者は、旅行、居住地、およびフラビウイルス曝露歴に関する質問を含む、スクリーニング前の短い研究電子データキャプチャ（REDCap）調査を受けます。 これらは非盲検の研究スタッフによって検討され、1 グループあたり 15 人の目標を達成するためにスクリーニング対象者を推薦します。 盲検化されていない研究スタッフは、他のフラビウイルスのスクリーニングを必要とするサンプル識別コードも研究室に提供します。

盲検化を維持するために、臨床チームは、対応するサンプル識別コードを含む参加者の名前のリストをパスワードで保護し、このリストは臨床チームと盲検化されていない研究スタッフのみが利用できるようにします。 研究チームは匿名化されたサンプルを受け取り、スクリーニング抗体データを生成して解釈し、サンプル識別コードとグループ割り当てを含むパスワードで保護された文書を作成します。 この文書は、研究室チームおよび盲検化されていない研究スタッフのみが利用できます。 スクリーニングを通じて、これら 2 つの文書は統計担当者と共有され、統計担当者は参加者の名前をグループ割り当てに関連付け、血清学の結果のみに基づいて登録資格のある個人のリストを提供します。 他のすべての適格基準は臨床チームによって評価されます。 グループ割り当てのルーチンの盲検解除は、45 人の参加者全員が研究 57 日目（一次および二次エンドポイント評価の最終日）を完了した後に行われます。 58 日から 180 日の間の AE 評価はベースラインの免疫状態の影響を受ける可能性が低く、90 日と 180 日の免疫原性評価は探索的エンドポイントである抗体の減少に焦点を当てています。

異型群では高度なウイルス血症や重篤な有害事象は予想されませんが、地元の蚊の季節の前に最初の6人の参加者に対して安全慣らし運転を実施します[40、41]。 このグループは最も懸念されるグループであるため、2 人の異型参加者が含まれます。 参加者が最初の 15 日間を終えた後、3、6、9、12、15 日目に採取したサンプルのウイルス培養によりウイルス血症を測定します。平均ピークウイルス血症力価が \(\le\)103 PFU のままであることを確認したら、 /mL で停止ルールが満たされていない場合 (表 4)、同意して個人にアドホックにワクチン接種し、ウイルス血症の遡及的 qRTPCR 評価に移行します。 安全性慣らし運転参加者の中に、培養別の平均ピークウイルス血症力価が 103 PFU/mL を超える人がいる場合、今後の蚊伝播の可能性に対する懸念が増大し、ワクチン接種の実施を蚊の季節以外に限定することになります。 最初の参加者のいずれかの平均ピークウイルス血症力価が 106 PFU/mL 以上である場合、これが症候性デング熱に関連する力価であることを考慮すると、安全性の懸念から試験を中止します。

研究採血にはすべての研究日の血清が含まれ、ウイルス血症（3～15日目）、サイトカインシグナル伝達、GMTおよびELISAによる抗体活性、細胞株および初代単球を用いた増強アッセイを使用した抗体依存性増強の評価に使用されます。 42]。 末梢血単核球 (PBMC) は、ワクチン接種前の LN FNA を使用して、0、1、3、6、9、15、28、57、90、180、および 365 日目に収集されます。PBMC は、以下の組み合わせを使用して特性評価されます。マルチパラメータフローサイトメトリーと単一細胞シーケンス。 分析には、一般的な細胞免疫表現型検査、B 細胞および T 細胞の活性化状態、および活性化誘導マーカー (AIM) アッセイによる抗原特異的 T 細胞の検出のための抗体パネルが含まれます。 細胞内サイトカイン染色により、DENV 感染および複製のマーカーとして細胞内 NS3 を検出できるようになります [43、44]。 ヒト白血球抗原 (HLA) タイピングはすべての個人に対して実行されます。

すべての LN FNA 手順は、1 mL の空気でプライミングした 10 mL シリンジを備えた 25G ベベル針を使用した 5 回の針吸引 (パス) で構成されます。 各パスは、軽い吸引を使用した 10 ～ 20 秒の移動で構成されます。 各針は、1 mL の培地で 2 ～ 3 回洗浄され、1 本の 15 mL コレクション チューブに入れられます。その後、細胞は凍結され、-140 °C で保存されます。 すべての LN FNA は、理想的には、ローカルランドマークの参照または登録を介して同じリンパ節から実行されます。

単一細胞免疫プロファイリング、ペア遺伝子および表面タンパク質発現プロファイル (CITE-seq: シーケンシングによるトランスクリプトームおよびエピトープの細胞インデックス [45])、B および T 細胞受容体の使用、および B 細胞抗原特異性 (LIBRA-seq: BCR のリンク) を通じて配列決定による抗原特異性の評価[46]）は、末梢血とLN FNAの両方についてワクチン接種前および15、28、および57日目に評価され、PBMCについてはより早い時点に拡大される可能性があります。 我々は、血清型特異的なエンベロープタンパク質プローブを使用して、ワクチン接種後の血清型特異的な交差反応性B細胞応答を特徴付ける予定です[46、47、48]。 すべての配列決定、細胞および抗体の特性評価は、遡及的にバッチで実行されます。

すべての被験者には、被験者名を生物学的サンプルにリンクする固有の被験者識別コードが割り当てられます。 研究室データの取得、入力、分析に関わる研究担当者は名前にアクセスできないため、被験者のプライバシーが保護されます。 登録時に、参加者は包括的な REDCap 調査に回答し、デング熱およびフラビウイルス流行地域で過ごした時間、関連する発熱性疾患、および潜在的な過去の DENV 感染に関するデータを収集します。 これらは、盲検解除後に臨床スタッフによって検討されます。 調査データは REDCap に保存され、臨床データは臨床研究管理情報システム (CRIMSON) に保存されます。 これらの安全な Web ベースのアプリケーションは、研究研究のためのデータ収集をサポートするように設計されており、NIAID で使用される中核的なデータ管理システムです。 すべてのデータは治験責任医師によってチェックされ、外部の治験モニターは治験が実施され、データがプロトコール、優れた臨床実践、および適用される規制要件に従って生成されたことを検証します。 すべてのデータは研究終了時にアーカイブされ、治験審査委員会の要件と一致する期間保持されます。 すべての生体サンプルは、NIAID および/またはフレドリック国立研究所で受け取られ、処理され、小分けされ、保管されます。 最終的な匿名化された検査データは、ImmPort および遺伝子型および表現型のデータベース (dbGaP) にアップロードされます。

サンプルサイズは、主要な安全性 (n = 45) および免疫原性 (グループあたり n = 15) エンドポイントを強化するために選択されました。 安全性の主要評価項目は、各グループにおける各ワクチン接種後 28 日間の局所的および全身的な反応原性の兆候および症状、各ワクチン接種後 28 日までの予期せぬ AE、および 180 日目までの SAE の頻度と重症度です (合計 n = 45)。 。 ワクチンに関連する可能性がある、おそらく、または明らかにワクチンに関連するSAEが1つ、または同様のグレード3以上のAEが少なくとも2つ観察された場合、研究は安全性評価のために一時停止されます。 このワクチン候補に関する以前の研究に基づいて、真の SAE 確率は 10% 未満であり、同様のグレード 3 または 4 の AE が 2 つ観察される確率は 15% 未満であると仮説を立てます。 真の SAE 率が 10% の場合、22 人の参加者が試験に登録されるまでに 1 つ以上の SAE が観察される確率は 90% です。 あるいは、真の SAE 率が 0.2% である場合、45 人の参加者のうち 1 人の SAE が観察される確率は 10% です。 同様のタイプのグレード 3/4 AE が 2 つ以上発生する真の割合が 15% である場合、最初の 29 人の試験参加者の間でこれが観察される確率は 80% となります。 ただし、2 つの同様のグレード 3/4 AE の真の割合が 0.5% である場合、45 人の参加者の間でこれが観察される確率は 2.8% になります。

この研究における主な免疫学的比較は、各グループ内で 0 日から 28 日の間に DENV 中和抗体 GMT の増加があるかどうかを判断し、3 日から 15 日まで測定されたグループ間の平均ピークウイルス血症力価を比較することです。各グループに 15 人の参加者が参加、有意水準が0.05。 このSDは、著者らがDENV血清陰性群および曝露群における四価ワクチン接種後0日目から28日目の間のDENV3 GMTの変化を評価した以前の研究に基づいている[49]。 暴露グループでは、GMT の変化は 9 (log10 = 0.95)、標準偏差は 0.81 であったと報告しました。 血清陰性グループでは、GMT の変化は 15.6 (log10 = 1.19) で、標準偏差は 0.56 でした。 ウイルス血症に関しては、以前の研究で、一価DENV2ワクチン接種後の血清陰性群と血清陽性群の間の平均ピーク力価の差が0.6であり、SDは血清陰性群で0.19、血清陽性群で0.57であると報告されている[25]。 1 グループあたり 15 個の場合、 3 つのグループすべてを比較するための有意水準 0.05/3。 したがって、この研究は、文献で報告されているものよりも小さな違いを検出するのに十分な力を持っています。

ワクチンの単回接種を受けるすべての参加者は、安全性と免疫原性について分析されます。 SAE と AE は、グレードと各 AE を持つ人の割合別に表にまとめられます。 グループ間の SAE と AE の比較は、全体の検定にはフィッシャーの正確検定を使用し、2 つのグループ比較にはフィッシャーの正確な無条件検定と比率の検定を使用して実行されます (R とfisher.test を使用するか、exact2 × 2 ライブラリの uncondExact2 × 2 を使用します)。 すべての免疫学的データは、log10 変換を使用して分析されます。 検出下限 (LLOD) を下回る観測値は、帰属された LLOD の 1/2 の値になります。 対応のある t 検定は各グループ内の連続エンドポイントの変化を評価するために使用され、t 検定はグループ間の連続エンドポイントの変化を評価するために使用されます。 連続データは、標準偏差と信頼区間を含む平均値として表示されます。 回帰モデルは、他の変数を制御するために連続データにも使用されます。 連続エンドポイントを比較するために t 検定を実行する予定です。 ただし、データの分布を盲検法で調べ、分布の偏りによりウィルコクソン検定がより適切であるかどうかを判断します。 免疫学的エンドポイントのカテゴリーデータは、信頼区間または相対リスクを伴うパーセンテージとして表示されます。または、リスクまたはオッズ比を推定するためにロジスティック回帰モデルを使用できます。 グループ間の AE 比較は、両側 0.05 の有意水準で実行されます。 一次免疫原性エンドポイントと二次免疫原性エンドポイントの比較は、両側有意水準 0.05 で実行されます。 すべての三次比較は探索的とみなされ、両側 0.05 の有意水準で実行されます。 二次分析として、年齢、性別、性別、DENV 曝露からの時間、および 0 日目の GMT を調整する回帰モデルも実行されます。 探索的解析には、一次感染時の適応免疫応答の開始および維持メカニズムと、二次感染および三次感染時に既存および想起/再活性化される免疫経路とを対比する確率数学モデルを使用した免疫表現型解析およびマルチオミクスデータの評価が含まれます。

自然感染コホート研究やワクチンの臨床試験では、DENVに対する宿主免疫応答の重要なパターンが明らかになっているが、血清型を超えた免疫の基礎となるメカニズムや防御の一貫して正確な相関関係は特定されていない。 この試験では、制御された環境と包括的な免疫学的技術を活用して、自然の DENV 感染歴の違いが、弱毒化された DENV 曝露に対する宿主の反応にどのような影響を与えるかを直接比較します。 研究参加者のほとんどはDENVの自然感染歴があり、その中には何年も前に感染した人もいるかもしれません。 DENV 曝露からの時間は病気と関連しており [6]、グローバル化した社会では旅行や移住が一般的であることを考慮すると、この集団におけるワクチンの安全性と免疫原性を評価することは、旅行者や海外駐在員に対するワクチン接種の取り組みに情報を提供することになります。 この試験はまた、逐次一価ワクチン接種でモデル化されたことのないDENV3についての理解を広げることになる[36]。 DENV3 は、抗体依存性の増強を受ける可能性、他の血清型と比較して構造タンパク質に重点を置いた T 細胞応答に対する独特の影響、および防御との一貫した相関関係の欠如で注目に値します [29、32]。 具体的には、TAK-003ワクチン試験では、両方の血清型に対する抗体力価が同等であったにもかかわらず、血清陰性の個人はDENV1に対して防御されたが、DENV3に対しては防御されなかった[50]。 血清陰性、異型、および多型の個人におけるDENV3に対する免疫応答を比較することで、軽度の免疫増強と中和免疫の関連マーカーおよび/またはドライバーを特定できる可能性があります。 最後に、LN FNA の評価により、強力な血清型を超えた免疫がどのように発達するかを評価することができ、連続曝露が広範な防御免疫を誘導する新規メカニズムの同定をサポートします。 グループ間でウイルス動態とB細胞およびT細胞の応答を経時的に比較することで、リスクと防御に関連するより正確なマーカーを特定できる可能性があります。

この研究には複数の長所と短所があります。 混乱を招く自然感染の可能性のリスクを最小限に抑えた管理された環境は、デング熱免疫学の基本的な疑問の探究を容易にします。 自然感染によるものと同様の B 細胞および T 細胞免疫反応を誘導する完全長の弱毒化生 DENV3 ワクチンを使用すると、強化と防御の安全なモデリングが容易になります [34、51]。 最近の研究では、TV003 一価ワクチン成分の弱毒化のメカニズムは、I 型インターフェロンシグナル伝達に対するウイルス株の感受性の増加であることが示唆されており、この形態の弱毒化は臨床分離株でも観察されている [52、53]。 したがって、リスクと防御に関連するマーカーは、自然感染におけるマーカーを反映している可能性があります。 ただし、風土病コホートでの検証が必要になります。

治験の制限には単一の血清型の使用が含まれており、これにより他の血清型に対する免疫応答の汎化可能性が制限される可能性があります。 非流行地域では、特にポリタイプグループの採用が難しい場合があります。 しかし、米国の平均と比較すると、メリーランド州モンゴメリー郡は収入の中央値が高く（米国の65,712ドルに対して110,389ドル）、非先住民生まれの住民の数（32.1%に対して13.7%）が高く、この地域で以前に DENV に曝露された旅行者や駐在員が増加している [54、55]。 外国生まれのモンゴメリー郡住民のうち、最も多い出身国の上位 3 つはすべてデング熱流行国であり、35.5% がエルサルバドル、19.9% がインド、12.9% がグアテマラである。 さらに、私たちの研究室には、デング熱流行地域に住んでいる、またはそこに旅行したことのある地元住民からなる小規模な観察コホートがあります (NIH IRB# 11-I-0109)。 限られた採用努力にもかかわらず、我々は 33 名をスクリーニングし、23 名を登録し、13 名の DENV 血清陽性者を特定しました。 ただし、地元の人材採用枠が限られているため、性別、年齢、人種/民族ごとに個人をマッチングするのは難しい場合があります。 したがって、トランスクリプトーム データは人口統計的要因の影響を受ける可能性があり、調整には高次元データの回帰および機械学習モデリングが必要になる場合があります。

最後に、一価ワクチン接種により将来の自然感染によるデング熱のリスクが高まる可能性があるため、血清反応陰性グループを含めることは複雑です。 しかし、複数のワクチンがフラビウイルス血清陰性の個体において一貫した血清型を超えた防御をうまく誘導できていないため、血清陰性の個体と血清陽性の個体における免疫応答を比較することが重要です。 理想的には、この研究により、フラビウイルス血清陰性の個人における将来のワクチン候補のより正確な評価が得られるでしょう。 このグループに対するリスクは、DENV に自然感染した人々のリスクと同じであると予想されます。 蚊の活動が活発なDENV流行地域にいる場合は、すべてのグループに忌避剤を着用し、スクリーンなどの予防措置を講じることが推奨されます。 フラビウイルス血清陰性の人をより適切に保護する必要性と、重篤なデング熱を回避するために利用できる比較的簡単な方法を考慮すると、フラビウイルス血清陰性の参加者を含めることは正当であると考えます。 当社の審査および同意プロセスでは、最初の接触からこのリスクについて明確に説明しており、理解を確認するために理解クイズを使用します。 また、参加者とそのプライマリケア提供者向けに、参加者が利用可能になった場合、または流行地域に移転した場合に4価のデング熱ワクチン接種を受けることを推奨するIRB承認の書簡も作成しました。 研究終了から5年以内に地域住民に対するデング熱ワクチンが承認された場合、参加者全員に連絡し、ワクチン接種を推奨する予定です。

この研究では、非流行地域に住む自然感染したヒトの一次、二次異型、三次以上のDENV曝露後の免疫反応を同時に広範囲に比較する。 我々の知る限り、これはDENV曝露前と連続後の両方で排出リンパ節のLN FNAを連続的に評価した最初の研究であり、HIVやSARS-CoV-2で実証されているように貴重な免疫学的データを提供するはずである[56、57]。 さらに、この研究は、デング熱文献における 2 つの重要な問題に取り組むことを目的としています。 第一に、デング熱ワクチン接種は安全であり、非流行地域に住む明確な DENV 曝露歴を持つ個人にとって免疫原性があるのでしょうか? 第二に、連続曝露はどのようなメカニズムで広範な防御的デング熱免疫を誘発するのでしょうか? 総合すると、この研究はワクチンの評価と、潜在的な標的集団を広げるための新しいワクチン戦略の設計に情報を提供する可能性があります。

データが収集および分析されると、結果は PubMed の査読済みジャーナルに掲載され、clinicaltrials.gov に投稿されます。 配列データは、遺伝子型および表現型データベース (dbGaP) に投稿されます。 フローサイトメトリーやELISAアッセイなどの他の実験の結果は、ImmPort共有データに投稿されます。 参加者の身元は匿名のままで、収集されたデータは集約された形式で表示されます。

メッシーナ JP、ブレイディ OJ、ゴールディング N、クレーマー MUG、ウィント GRW、レイ SE、ピゴット DM、シアラー FM、ジョンソン K、アール L、他現在および将来のデング熱のリスクにさらされている世界の分布と人口。 ナット微生物。 2019;4(9):1508–15。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Zeng Z、Zhan J、Chen L、Chen H、Cheng S. 1990 年から 2017 年までの世界、地域、および国内のデング熱負担: 2017 年の世界的な疾患負担に基づく体系的分析。EClinicalMedicine 2021、32。

マレー CJL、バーバー RM、フォアマン KJ、オズゴレン AA、アブドアッラー F、アベラ SF、アボヤンズ V、エイブラハム JP、アブバカール I、アブラダッド LJ、他。 1990 年から 2013 年までの 306 の病気や傷害の世界、地域、国の障害調整生存年 (DALY) と 188 か国の健康寿命 (HALE): 疫学的な変遷を定量化。 ランセット。 2015;386(10009):2145–91。

記事 Google Scholar

Wilder-Smith A. 2020 年までのデング熱ワクチン開発: 課題と展望。 カー・オピン・ヴィロル。 2020;43:71–8。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

水本 K、江島 K、山本 T、西浦 H. 二次感染時の重症デング熱のリスクについて: 数学的モデリングと組み合わせた系統的レビュー。 J ベクトル ボーン ディス。 2014;51(3):153–64。

PubMed Google Scholar

グスマンMG、クーリーG、バルデスL、ブラボーJ、バスケスS、ハルステッドSB。 デング熱 2 型二次感染症の重症度の増加: 1981 年と 1997 年のキューバでの流行における死亡率。 パナム公衆衛生牧師。 2002;11(4):223–7。

論文 PubMed Google Scholar

ハルステッドSB。 受動的に移入された抗体によるアカゲザルにおけるデングウイルス感染の生体内増強。 J 感染障害 1979;140(4):527–33。

論文 CAS PubMed Google Scholar

ウィジェラトネ DT、フェルナンド S、ゴメス L、ジーワンダラ C、ジネリヤ A、サマラセカラ S、ウィジェヴィクラマ A、ハードマン CS、オッグ GS、マラヴィッジ GN。 デング熱ウイルス特異的 T 細胞応答の定量化、および急性デング熱感染症におけるウイルス量および臨床疾患の重症度との相関関係。 PLoS ネグル トロップ ディス。 2018;12(10):e0006540​​。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Kirkpatrick BD、Durbin AP、Pierce KK、Carmolli MP、Tibery CM、Grier PL、Hynes N、Diehl SA、Elwood D、Jarvis AP、他。 フラビウイルスに感染していない健康な成人に弱毒化四価デング熱生ワクチンを単回投与すると、4 つのデング熱ウイルス血清型すべてに対する強力でバランスの取れた免疫応答が得られます。 J 感染障害 2015;212(5):702–10。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Whitehead SS、Durbin AP、Pierce KK、Elwood D、McElvany BD、Fraser EA、Carmolli MP、Tibery CM、Hynes NA、Jo M、他。 ランダム化試験では、弱毒化四価デング熱生ワクチン TV003 は、ワクチン接種前にフラビウイルスに曝露された被験者において忍容性が高く、免疫原性が高いことが示されました。 PLoS ネグル トロップ ディス。 2017;11(5):e0005584。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

カラス EG、プレシオーソ AR、パラシオス R、トメ B、ブラガ PE、ヴァンニ T、カンポス LMA、フェラーリ L、モンディーニ G、ダ グラサ サロマン M、他。 ブラジルの成人を対象とした四価弱毒生デング熱ワクチン ブタンタン DV の安全性と免疫原性: 2 段階、二重盲検、ランダム化プラセボ対照第 2 相試験。 ランセット感染症 2020;20(7):839–50。

論文 CAS PubMed Google Scholar

ブタンタンのデング熱。 ワクチンの有効性は79.6%であり、2年間の追跡調査の結果の一部が示されている。

ラウト R、コルベット KS、テンネコーン RN、プレマワンサ S、ウィイェヴィクラマ A、プレマワンサ G、ミエシュコフスキー P、リュッケルト C、エベル GD、デ シルバ AD、他。 ヒトで流行しているデング熱 1 型ウイルスは感染力が高く、ヒト抗体による中和が不十分です。 Proc Natl Acad Sci US A. 2019;116(1):227–32。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Morrison D、Legg TJ、Billings CW、Forrat R、Yoksan S、Lang J. 新しい 4 価のデング熱ワクチンは、フラビウイルスに感染したことのない成人において忍容性が高く、4 つの血清型すべてに対して免疫原性があります。 J 感染障害 2010;201(3):370–7。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Forrat R、Dayan GH、DiazGranados CA、Bonaparte M、Laot T、Capeding MR、Sanchez L、Coronel DL、Reynales H、Chansinghakul D、他。 アジアとラテンアメリカにおける四価デング熱ワクチン（CYD-TDV）有効性試験の6年間の追跡調査における入院患者および重症デング熱患者の分析。 クリン感染症 2021;73(6):1003–12。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sáez-Llorens X、Tricou V、Yu D、Rivera L、Tuboi S、Garbes P、Borkowski A、Wallace D. アジアおよびラテンアメリカの小児における武田薬品の 4 価デング熱ワクチンの 1 回接種と 2 回接種の安全性と免疫原性: の中間結果第2相、無作為化プラセボ対照試験。 ランセット感染症 2017;17(6):615–25。

論文 PubMed Google Scholar

ロペス＝メディナ E、ビスワル S、サエズ＝ジョレンス X、ボルハ＝タボラ C、ブラボー L、シリヴィチャヤクル C、バルガス LM、アレラ MT、ベラスケス H、レイナレス H 他ワクチン接種から2年後の健康な小児および青少年におけるデング熱ワクチン候補（TAK-003）の有効性。 Jインフェクトディス2020。

リベラ L、ビスワル S、サエス＝ローレンツ X、レイナレス H、ロペス＝メディナ E、ボルハ＝タボラ C、ブラボー L、シリヴィチャヤクル C、コサララクサ P、マルティネス バルガス L 他武田薬品のデング熱ワクチン候補（TAK-003）の3年間の有効性と安全性。 クリン感染12月

Gibbons RV、Kalanarooj S、Jarman RG、Nisalak A、Vaughn DW、Endy TP、Mammen MP Jr、Srikiatkhachorn A. 入院とデング出血熱を引き起こす 3 回目または 4 回目のデング熱感染の頻度を推定するための、デング熱による反復入院の分析。および血清型配列。 アム・ジェイ・トロップ・メッド・ヒグ。 2007;77(5):910–3。

論文 PubMed Google Scholar

ロウビンスキー A、グアルダード=カルボ P、バルバ=スペイス G、デュケロイ S、ヴァニー MC、キクティ CM、ナバロ サンチェス ME、デジニラッティサイ W、ウォンウィワット W、ハウズ A、他。 デング熱ウイルスに対する広範な中和ヒト抗体の認識決定因子。 自然。 2015;520(7545):109–13。

論文 CAS PubMed Google Scholar

ダーラム ND、アグラワル A、ウォルタリ E、クルート D、ザニーニ F、フーチ M、デビッドソン E、スミス O、カラバハル E、パク JE 他単一 B 細胞トランスクリプトミクスによって同定された、デング熱ウイルスに対する広範な中和ヒト抗体。 イーライフ 2019、8.

de Silva AM、Harris E. どのデング熱ワクチンアプローチが最も有望ですか?また、ワクチン接種後の疾患の増強を懸念する必要がありますか? デング熱ワクチンへの道：ヒトの自然なデング熱感染症の研究とワクチン試験から学ぶ。 コールドスプリングハーブの視点バイオル。 2018;10(6):a029371。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

Weiskopf D、Angelo MA、Sidney J、Peters B、Shresta S、Sette A。感染したデング熱ウイルスの血清型および一次感染と二次感染の関数として免疫優性は変化します。 J・ヴィロル。 2014;88(19):11383–94。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

Hou J、Shrivastava S、Loo HL、Wong LH、Ooi EE、Chen J. 逐次免疫は、4 つのデング熱ウイルス血清型すべてに対して強力かつ広範な免疫を誘導します。 NPJワクチン。 2020;5(1):68。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

ダービン AP、シュミット A、エルウッド D、ワニネック KA、ロブチク J、トゥマール B、マーフィー BR、ホワイトヘッド SS。 弱毒化単型デングウイルス生ワクチンによる異型デング熱感染：デング熱が風土病となっている地域における集団のワクチン接種への影響。 J 感染障害 2011;203(3):327–34。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

ブレイニー JE Jr、サテ NS、ゴダード L、ハンソン CT、ロメロ TA、ハンリー KA、マーフィー BR、ホワイトヘッド SS。 3' 非翻訳領域 (3'-UTR) への欠失の導入、または DENV-3 3'-UTR と DENV-4 の 3'-UTR の交換によって生成されたデング熱ウイルス 3 型ワクチン候補。 ワクチン。 2008;26(6):817–28。

論文 CAS PubMed Google Scholar

ブレイニー JE Jr、ハンソン CT、ファイアストン CY、ハンリー KA、マーフィー BR、ホワイトヘッド SS。 遺伝子組み換えされた弱毒生デング熱ウイルス 3 型ワクチン候補。 アム・ジェイ・トロップ・メッド・ヒグ。 2004;71(6):811–21。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Kirkpatrick BD、Whitehead SS、Pierce KK、Tibery CM、Grier PL、Hynes NA、Larsson CJ、Sabundayo BP、Talaat KR、Janiak A、他。 デング熱弱毒化生ワクチン TV003 は、ヒト攻撃モデルにおいてデング熱に対する完全な防御を引き出します。 科学翻訳医学。 2016;8(330):330ra336。

記事 Google Scholar

カッツェルニック LC、ナルバエス C、アルゲッロ S、ロペス メルカド B、コラード D、アンピー O、エリゾンド D、ミランダ T、バストス カリージョ F、メルカド JC 他ジカウイルス感染は、将来の重篤なデング熱のリスクを高めます。 科学。 2020;369(6507):1123–8。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

ダービン AP、カークパトリック BD、ピアース KK、シュミット AC、ホワイトヘッド SS。 弱毒生四価DENVワクチンに含まれる成分を特定するための複数の治験用一価DENVワクチンの開発と臨床評価。 ワクチン。 2011;29(42):7242–50。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

グスマン MG、アルバレス A、バスケス S、アルバレス M、ロサリオ D、ペラエス O、クルス G、ロドリゲス R、パボン A、ゴンザレス A 他 2001 ～ 2002 年にキューバのハバナのプラヤ市で行われたデング熱ウイルス 3 型に関する疫学研究。 Int J 感染障害 2012;16(3):e198–203。

論文 PubMed Google Scholar

ワイスコフ D、サーパス C、アンジェロ MA、バングス DJ、シドニー J、ポール S、ピーターズ B、サンチェス FP、シルベラ CG、コスタ PR、他。 4 つのデング熱ウイルス血清型に対するヒト CD8 + T 細胞の応答は、タンパク質標的の異なるパターンと関連しています。 J 感染障害 2015;212(11):1743–51。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

オソリオ JE、ベレス ID、トムソン C、ロペス L、ヒメネス A、ハラー AA、シレンゴ S、スコット J、ボローズ KL、ストーバル JL、他。 コロンビアのフラビウイルス未感染健康成人における組換え弱毒化四価デング熱生ワクチン（DENVax）の安全性と免疫原性：無作為化プラセボ対照第1相研究。 ランセット感染症 2014;14(9):830–8。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

ポッパー SJ、ストラウツ FR、リンドウ JC、チェン HK、モントーヤ M、バルマセダ A、ダービン AP、ホワイトヘッド SS、ハリス E、カークパトリック BD、他。 デング熱ワクチン接種後の初期の転写反応は、自然感染に対する反応を反映し、中和抗体力価を予測します。 J 感染障害 2018;218(12):1911–21。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

Mammen MP、Lyons A、Innis BL、Sun W、McKinney D、Chung RC、Eckels KH、Putnak R、Kanesa-thasan N、Scherer JM、他。 ヒト攻撃研究のためのデング熱ウイルス株の評価。 ワクチン。 2014;32(13):1488–94。

論文 CAS PubMed Google Scholar

サン W、エッケルス KH、プトナック JR、ライオンズ AG、トーマス SJ、ヴォーン DW、ギボンズ RV、フェルナンデス S、ギュンター VJ、マメン MP Jr.、他。 以前に弱毒化四価デング熱生ワクチンを接種したヒト被験者の実験的デング熱ウイルス攻撃。 J 感染障害 2013;207(5):700–8。

論文 CAS PubMed Google Scholar

ダービン AP、ピアース KK、カークパトリック BD、グリア P、サブンダヨ BP、ヘ H、ソーサー M、ラッセル AF、マーティン J、ハイアット D、他。 以前に弱毒化四価デング熱生ワクチンを接種した成人における四価組換えサブユニットデング熱ワクチンの免疫原性と安全性：第I相ランダム化臨床試験の結果。 アム・ジェイ・トロップ・メッド・ヒグ。 2020;103(2):855–63。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

モハンティ L、プラブ M、クマール ミシュラ A、パーティ AJ、カヌンゴ R、ゴーシュ G、プラハン クマール R、ニュートン ラージ A、ブーシャン S、クマール ジャンギル M、他。 健康なインド成人に対する単回投与の弱毒生「四価デング熱ワクチン」の安全性と免疫原性。 無作為化二重盲検プラセボ対照第I/II相試験。 ワクチン X。2022;10:100142。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Bettini E、Lederer K、Sharpe H、Kaminski M、Jones L、Locci M。SARS-CoV-2 ワクチン接種に対するヒト胚中心の反応を評価するための、細針吸引とスペクトル フローサイトメトリーを組み合わせたアプローチ。 スタープロトコル 2022;3(4):101840。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

メリーランド州のアジアタイガーモスキート。 [https://mda.maryland.gov/plants-pests/Pages/asian_tiger_mosquito_md.aspx]。

モナハン AJ、モーリン CW、シュタインホフ DF、ウィルヘルミ O、ヘイデン M、クアトロキ DA、ライスキンド M、ロイド AL、スミス K、シュミット CA 他。 米国本土におけるジカウイルス媒介蚊ネッタイシマカの季節的な発生と豊富さについて。 PLoS カレント 2016、8.

フリプス J、ディオサトロ MA、ホルンウェグ TE、ファン デ ポル DPI、ウルクキインチマ S、スミット JM。 初代ヒトマクロファージにおけるデングウイルス感染の抗体依存性の増強。 抗ウイルス反応に対する高次融合のバランスをとる。 Sci Rep. 2016;6(1):29201。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Grifoni A、Voic H、Dhanda SK、Kidd CK、Brien JD、Buus S、Stryhn A、Durbin AP、Whitehead S、Diehl SA 他。 弱毒化フラビウイルスワクチン接種によって誘導される T 細胞応答は特異的であり、他のフラビウイルス種との交差反応性は限られています。 J Virol 2020、94(10)。

Balsitis SJ、Coloma J、Castro G、Alava A、Flores D、McKerrow JH、Beatty PR、Harris E. ウイルス非構造タンパク質 3 特異的免疫染色によって定義される、マウスおよびヒトにおけるデング熱ウイルスの向性。 アム・ジェイ・トロップ・メッド・ヒグ。 2009;80(3):416–24。

論文 PubMed Google Scholar

Stoeckius M、Hafemeister C、Stephenson W、Houck-Loomis B、Chattopadhyay PK、Swerdlow H、Satija R、Smibert P。単一細胞におけるエピトープとトランスクリプトームの同時測定。 ナットメソッド。 2017;14(9):865–8。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Setliff I、Shiakolas AR、Pilewski KA、Murji AA、Mapengo RE、Janowska K、Richardson S、Oosthuysen C、Raju N、Ronsard L、他。 B 細胞受容体配列の抗原特異性へのハイスループット マッピング。 細胞。 2019;179(7):1636–1646–1615。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Kudlacek ST、Metz S、Thiono D、Payne AM、Phan TTN、Tian S、Forsberg LJ、Maguire J、seim I、Zhang S、他。 設計された高発現の熱安定性デングウイルス 2 エンベロープタンパク質二量体は、四次エピトープ抗体を誘発します。 科学上級 2021;7(42):eabg4084。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

リマ NS、ムサエフ M、ジョンストン TS、ワグナー DA、ヘンリー AR、ワン L、ヤン ES、チャン Y、ビルンギ K、ブラック WP、他。 SARS-CoV-2 変異体への一次曝露により、収束したエピトープ特異性、免疫グロブリン V 遺伝子の使用、および公開 B 細胞クローンが誘発されます。 ナットコミューン。 2022;13(1):7733。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

ラッセル KL、ラップ RE、モラレス-ラミレス JO、ディアス-ペレス C、アンドリュース CP、リー AW、フィン TS、コックス KS、フォーク ラッセル A、シャラー MM、他。 フラビウイルス未感染およびフラビウイルス感染経験のある健康な成人を対象とした、弱毒化四価デング熱生ワクチンの安全性、忍容性、免疫原性を評価する第I相ランダム化二重盲検プラセボ対照試験。 うーん、ワクチン免疫担当者。 2022;18(5):2046960。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

リベラ L、ビスワル S、サエス＝ローレンツ X、レイナレス H、ロペス＝メディナ E、ボルハ＝タボラ C、ブラボー L、シリヴィチャヤクル C、コサララクサ P、マルティネス バルガス L、他。 武田薬品のデング熱ワクチン候補（TAK-003）の3年間の有効性と安全性。 クリン感染症 2022;75(1):107–17。

論文 PubMed Google Scholar

ワイスコフ D、アンジェロ MA、バングス DJ、シドニー J、ポール S、ピーターズ B、デ シルバ AD、リンドウ JC、ディール SA、ホワイトヘッド S、他。 弱毒生四価デング熱ワクチンによって誘導されるヒト CD8 + T 細胞応答は、高度に保存されたエピトープに対して向けられます。 J・ヴィロル。 2015;89(1):120–8。

論文 PubMed Google Scholar

バストス＝アリアガ J、グロモフスキー GD、ツェサルキン KA、ファイアストン CY、カストロ＝ヒメネス T、プレトニョフ AG、セディージョ＝バロン L、ホワイトヘッド SS。 ワクチン候補DEN4Δ30に感染したヒト細胞におけるサブゲノムRNAの蓄積が減少すると、I型インターフェロンに対するウイルス感受性が増加します。 ワクチン。 2018;36(24):3460–7。

論文 CAS PubMed Google Scholar

カストロ＝ヒメネス TK、ゴメス＝レゴレッタ LC、ロペス＝カンパ LA、マルティネス＝トーレス V、アルバラド＝シルバ M、ポサダス＝モンドラゴン A、ディアス＝リマ N、アングロ＝メンデス HA、メヒア＝ドミンゲス NR、ヴァカ＝パニアグ F、他。 メキシコ・オアハカ産のデング熱およびジカウイルスの臨床分離株間のI型インターフェロン反応に対する感受性およびサブゲノムRNA蓄積のばらつきは、ヒト細胞における複製効率および疾患重症度と相関する。 フロントセルは微生物に感染します。 2022;12:8

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

米国国勢調査局、QuickFacts。 2022 年 10 月 18 日にアクセス。https://www.census.gov/quickfacts。

Deloitte と DataWheel、Data USA。 アメリカ。 2022 年 10 月 18 日にアクセス。https://datausa.io/profile/geo/united-states。

パウトナー M、ハーフナー・ドートン C、ソク D、ンコロラ JP、バスティダス R、ブーパシー AV、カーナサン DG、チャンドラシェカール A、シレッリ KM、コットレル CA、他。 最適化されたアプローチを使用した HIV エンベロープ トリマー免疫による非ヒト霊長類における強力な Tier 2 中和抗体応答の誘発。 免疫。 2017;46(6):1073–1088e1076。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Cirelli KM、Carnathan DG、Nogal B、Martin JT、Rodriguez OL、Upadhyay AA、Enemuo CA、Gebru EH、Choe Y、Viviano F、他。 ゆっくりとした送達による免疫化は、免疫優勢の調節を介して HIV 中和抗体と胚中心の反応を強化します。 細胞。 2019;177(5):1153–1171e1128。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

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適用できない。

国立衛生研究所 (NIH) によって提供されるオープンアクセス資金。 この研究は、国立アレルギー感染症研究所の学内研究プログラムによって支援されました。 VCは、契約番号HHSN261201500003Iに基づき、国立がん研究所、国立衛生研究所から資金提供を受けました。 この出版物の内容は必ずしも保健社会福祉省の見解や方針を反映するものではなく、商号、商品、または組織への言及は米国政府による承認を意味するものでもありません。 資金提供者は研究計画や原稿の準備において何の役割も果たしませんでした。

ウイルス疫学および免疫ユニット、国立衛生研究所、国立アレルギー感染症研究所、感染症研究所、ベセスダ、メリーランド州、米国

カミラ・D・オーディオ、ケルシー・E・ロウマン、メリッサ・ロー、ローズマリー・A・アオゴ、サバ・フィルダス、クロエ・M・ハスンド、チャーリー・ヴォアリン、リア・C・カッツェルニック

ケンブリッジ大学獣医学部、ウイルス人獣共通感染症研究室、ケンブリッジ、英国

ケルシー・E・ロウマン

米国国立衛生研究所、国立アレルギー感染症研究所、生物統計研究部門、臨床研究部門、ベセスダ、メリーランド州、米国

サリー・ハンスバーガー

インターベンショナル放射線学およびインターベンション腫瘍学センター、NIH 臨床センターおよび国立がん研究所、国立衛生研究所、ベセスダ、メリーランド州、米国

ブラッド・J・ウッド、マイケル・カシン、エリオット・レヴィ

臨床モニタリング研究プログラム総局、フレデリック国立がん研究所、米国フレデリック

ヴィヴィアン・カリエ

米国メリーランド州ベセスダ、国立衛生研究所、NIH 臨床センター薬剤部

ロビー・カッタプラム

国際研究センター、国立アレルギー感染症研究所、国立衛生研究所、プノンペン、カンボジア

クリスティーナ・イェック & ジェシカ・マニング

国立衛生研究所、国立アレルギー感染症研究所、マラリアおよびベクター研究研究所、米国メリーランド州ベセスダ

クリスティーナ・イェック & ジェシカ・マニング

米国メリーランド州ボルチモア、ジョンズ・ホプキンス大学ブルームバーグ公衆衛生大学院国際保健学部

アンナ・ダービン

米国国立衛生研究所、国立アレルギー感染症研究所、ウイルス疾患研究室、アルボウイルスワクチン研究セクション、ベセスダ、メリーランド州、米国

スティーブン・S・ホワイトヘッド

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CDO はプロジェクトを概念化し、最初の原稿草案を書き、表 1、2、3、および 4 を作成しました。KEL はプロジェクトを概念化し、図 1 を準備し、原稿執筆を支援し、表 1 の準備を支援しました。ML は最初のプロトコルと同意書の草案を支援し、盲検化計画を概念化し、表 3 を準備し、参加者の訪問のための標準操作手順を開発します。 RA は投影されたものを概念化しました。 SH は、サンプル サイズと正当性、一次および二次エンドポイントの統計計画を設計し、盲検化計画と安全性の慣らし運転の概念化を支援しました。 BJW、MK、EL は、細針リンパ節吸引の手術手順の開発に協力しました。 VC は、盲検化計画と安全慣らし運転の開発と実施を支援しました。 SF と CH は、スクリーニング抗体アッセイの開発と実装を支援しました。 CV は、用量を確認するためのワクチン滴定アッセイの開発と最適化に役立ちました。 RK はワクチン調製プロトコルを開発し、最適化しました。 CY は、参加者の訪問のための標準手順の開発を支援しました。 JM は、プロジェクトの概念化と安全性の慣らし運転の開発を支援しました。AD は、rDEN3Δ30/31-7164 の調製、滴定、ワクチン接種の初期プロトコルと、参加者の訪問と中止ルールの標準手順を開発しました。 SSW は、rDEN3Δ30/31-7164 の調製、滴定、ワクチン接種と中止のルールに関する初期プロトコルを開発しました。 スクリーニング抗体アッセイを開発し、中和アッセイ用のウイルスを提供しました。 LCK はプロジェクトを概念化し、原稿の執筆を支援し、図 1 の準備を支援しました。 表 1、作成済み 図 2. 著者全員が原稿をレビューし、編集しました。

カミラ・D・オディオまたはリア・C・カッツェルニックとの通信。

この研究プロトコールおよびインフォームドコンセントフォームは、NIAID 治験審査委員会 (IRB #001078) によって審査され、承認されました。 適格な参加者には、研究に参加し、同意書に署名する前に治験審査委員会が承認した理解度クイズに回答して理解を確認する平等な機会が与えられます。 すべての参加者からインフォームドコンセントが得られました、または得られる予定です。 すべての方法は、国立衛生研究所 (NIH) のガイドラインおよび規制に従って実行されました。 すべての実験プロトコルは、NIH のバイオセーフティ委員会によって承認されました。

適用できない。

著者は利益相反がないことを宣言します。

シュプリンガー ネイチャーは、発行された地図および所属機関における管轄権の主張に関して中立を保ちます。

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転載と許可

オディオ、CD、ロウマン、KE、ロー、M. 他一価ワクチンを使用した一次、二次、三次デング熱をモデル化する第 1 相試験。 BMC Infect Dis 23、345 (2023)。 https://doi.org/10.1186/s12879-023-08299-5

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受信日: 2023 年 4 月 11 日

受理日: 2023 年 5 月 3 日

公開日: 2023 年 5 月 23 日

DOI: https://doi.org/10.1186/s12879-023-08299-5

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